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RNA切割用重组CRISPR-Cas13a蛋白
发布时间:2020-02-09        浏览次数:13        返回列表

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Cas13a是VI型CRISPR-Cas系统效应蛋白,具有RNA介导的RNA酶切活性,是目前第二大类CRISPR-Cas系统发现的唯一能够降解RNA的蛋白。Cas9,Cpf1,C2c1均是由RNA介导的DNA核酸内切酶,对开发研究RNA工具,扩展CRISPR系统在基因编辑方面的运用具有重大价值。


CRISPR-Cas13a介导RNA病毒基因组靶向


古菌和细菌,利用CRISPR-Cas系统抵御外源DNA浸染的Cas蛋白有多种,它们都是由向导RNA介导的切割目标DNA的DNA核酸内切酶,如Cas9, Cpf1, C2c1等。Cas9和Cpf1已成功开发为重要的基因编辑工具,它们可作为开展基因功能研究、寻找合适药物作用靶标的巧妙工具。


此前,基因编辑工具CRISPR-Cas9可以纠正个体细胞内的缺陷,预测可以治愈或预防多种人类疾病。但Cas9系统改变的是DNA,而不是RNA。专业人士认为CRISPR平台事实上也可以用来修改RNA。CRISPR最开始被发现在细菌中可将一段遗传密码换成另一段遗传密码,所以被称为“分子剪刀。在CRISPR-Cas9系统中,Cas9是切割DNA的酶。


针对RNA的编辑工具也可以帮助科学家们修改基因的活性,同时不会对基因本身造成永久性改变。为研究RNA转录和RNA与基因位点的关系,CRISPR-dCas13系统与CRISPR-dCas9系统实现了对基因转录的RNA和基因位点的同时标记,提供了一个简单和便利的新手段。针对2019新型冠状病毒(2019-nCoV)研究应用时应注意,由于肺炎病毒RNA含量低,需要进行扩增插入探针,与13a反应被切割后检测出来。


西宝生物现货提供的CRISPR-Cas13a由含有Cas13a基因的大肠杆菌经发酵,然后通过分离方法之后,经过纯化后再冻干制成。


CRISPR-Cas13a 
纯度>95% (SEC-HPLC/SDS-PAGE)
规格参数:100ug/1mg使用说明:
将冻干 Cas13a纯水溶解,浓度>100μg/ml,稀释至工作浓度。避免反复冻融。复溶后4℃可稳定储存7-10天;短期保存请分装后存放于-20℃。


产品特点:
含有Cas13a基因的E.coli经发酵分离和高度纯化后冻干


产品用途:

体外RNA切割;体外RNA检测;活细胞RNA的调控、RNA基因编辑;光学探针生物学标记。


相关产品推荐

名称
英文名称
规格
分子量或比活
纯度
CRISPR-Cas9
Recombinant CRISPR-Cas9
100/500pmol
175KD
>95%
CRISPR-Cas12a
Recombinant CRISPR-Cas12a
100/2000pmol
140KD
>95%
CRISPR-Cas13a
Recombinant CRISPR-Cas13a
100/500pmol
140KD
>95%
SUMO蛋白酶
Recombinant SUMO Protease
1000U
20000U/mg
>95%
TEV蛋白酶
Recombinant TEV Protease
1000/10000U
1000U/mg
>99%
根据Cas蛋白的分类和效应复合物的性质主要分为两大类Class 1和Class 2,六种不同类型。
1类系统包括类型I、III、IV,效应复合物由多个Cas蛋白 (具有一个或多个内切酶活性组分) 组成并与crRNA紧密结合,
2类系统包括类型II、V和VI,只有一个具有内切酶活性的多结构蛋白。
 
II类CRISPR-Cas系统CRISPR/Cas9系统已用于基因敲除和敲入以及基因组标记等,方便基因操作和基因组研究。
 
而VI类系统又叫CRISPR-Cas13系统,是向导RNA介导的RNA靶向的内切酶系统,从15年被发现至今一共鉴定出四个亚型:VI-A(Cas13a/C2c2), VI-B(Cas13b), VI-C(Cas13c)和VI-D(Cas13d)。已经开始运用于RNA的敲低,RNA定点编辑,RNA检测以及RNA剪接调控。
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