近年来，β-淀粉样蛋白（Aβ）寡聚体作为阿尔茨海默病因而倍受瞩目。众所周知，Aβ寡聚体是Aβ单体的可溶性凝集体，会抑制神经细胞的突触功能。
Aβ寡聚体中，按照分子量的大小，可以分成低分子量的Aβ寡聚体（Low-n 寡聚体）和高分子的Aβ寡聚体（ADDL、Aβ*56、原纤维（Profibril））。
有相关的报告指出，高分子Aβ寡聚体的Aβ*56（12-mer）对记忆损伤的影响极大，在认知功能正常的成年人中，Aβ*56比二聚体、三聚体先增加并与Tau蛋白相关，二聚体、三聚体形式的Aβ不与Tau相关。Wako推出了高分子β-淀粉样蛋白寡聚体ELISA试剂盒用于阿尔兹海默症研究用，性能优越，咨询订购请拨打：400-021-8158
1) Lesné, S., et al.: Nature, 440, 7082, 352(2006).
2) Lesné, S. E., et al.: Brain,136, 1383(2013).
2) Lesné, S. E., et al.: Brain,136, 1383(2013).
特点：
可特异性地对9-mer以上的高分子Aβ寡聚体进行定量
试剂盒内容
① 抗体（BAN50）固相化96孔板——1个
② 标准溶液（10nM）——100μL
③ 缓冲液——60mL
④ 生物素偶联抗体（BAN50）溶液——100μL
⑤ 过氧化物酶偶联链霉亲和素溶液——100μL
⑥ 显色剂1——6mL
⑦ 显色剂2——6mL
⑧ 洗涤液（10×）——100mL
⑨ 封板贴——3张
② 标准溶液（10nM）——100μL
③ 缓冲液——60mL
④ 生物素偶联抗体（BAN50）溶液——100μL
⑤ 过氧化物酶偶联链霉亲和素溶液——100μL
⑥ 显色剂1——6mL
⑦ 显色剂2——6mL
⑧ 洗涤液（10×）——100mL
⑨ 封板贴——3张
试剂盒功能
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标准曲线范围
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0.410~100 pM※1
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反应Aβ寡聚体
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≧9mer的Aβ寡聚体
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检测对象样本※2
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脑脊髓液
in vitro Aβ寡聚体 |
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交叉反应
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人
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样本体积
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25 μL（4倍稀释）
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检测时间
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4.5小时
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检测方法
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发光法※3
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※1 基于16-mer多抗原肽（MAP）标准品的换算值。
※2 不推荐使用血浆、血清作为样本。
※3 检测时需要准备酶标仪。
※2 不推荐使用血浆、血清作为样本。
※3 检测时需要准备酶标仪。
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产品编号
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产品名称
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规格
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包装
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298-80101
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High Molecular Amyloid β Oligomer ELISA Kit Wako
高分子β-淀粉样蛋白寡聚体ELISA试剂盒
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免疫化学用
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96次用
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检测原理
这种使用抗Aβ抗体（BAN50）进行捕获和检测的的双抗体夹心法ELISA系列，与1-8-mer几乎不发生反应，与9-mer以上的Aβ寡聚体则发生特异性反应。
使用带有16个抗Aβ抗体（BAN50）的抗原决定簇的16-mer MAP作为标准品。
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3）Fukumoto, H., et al.: FASEB J.,24, 2716(2010).
4）Kasai, T., et al.: Biochem. Biophys.Res. Commun., 422, 3, 375(2012).
4）Kasai, T., et al.: Biochem. Biophys.Res. Commun., 422, 3, 375(2012).
高分子Aβ寡聚体的特异性数据
将Aβ1-42冷藏于4℃并孵育一晚后，通过超滤将不足30kDa（8聚体以下）和大于等于30kDa（九聚体以上）的Aβ寡聚体分离，分别把回收到的片段进行Western Blot和本ELISA检测。
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■ Western Blot（抗Aβ抗体（BAN50）） |
■ Aβ寡聚体ELISA |
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→八聚体以下（＜30kDa）的Fraction B几乎检测不到信号；九聚体以上（≥30kDa）的Fraction A则检测到强烈的信号。
检测案例——人脑脊髓液
用本ELISA法和其他公司的产品分别对非认知症患者（Control）和阿尔茨海默病（AD）患者脑脊髓液中的Aβ寡聚体进行检测。
| Wako产品 | 其他公司产品 |
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1
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MMSEscore※4
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FUJIFILM Wako
Aβ寡聚体试剂盒(pM） |
其他公司
Aβ寡聚体试剂盒(pg/mL) |
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Control1
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—
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0.98
|
ND
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Control 2
|
—
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1.99
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33
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Control 3
|
—
|
1.69
|
37
|
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Control 4
|
—
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4.59
|
88
|
|
Control 5
|
—
|
1.73
|
55
|
|
AD1
|
20
|
4.40
|
90
|
|
AD2
|
20
|
4.11
|
113
|
|
AD3
|
26
|
4.95
|
100
|
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AD4
|
24
|
5.84
|
78
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AD5
|
15
|
5.74
|
105
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※4 MMSEscore：认知功能诊断问诊检查的评分
30-28分：正常； 27-24分：怀疑有轻度认知障碍； 23分以下：怀疑严重认知症
30-28分：正常； 27-24分：怀疑有轻度认知障碍； 23分以下：怀疑严重认知症
→本产品在检测非认知症患者（Control）和阿尔茨海默病患者（AD）二者时的检测值有明显差异。另外，比其他公司产品检测非认知症患者（Control）和阿尔茨海默病患者（AD）群也有更明显的差异。
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