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什么是外泌体?
发布时间:2019-11-01        浏览次数:204        返回列表

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近年来,细胞外囊泡(EV)相关的研究正加速发展。2011年每年有约200篇相关论文发布,但2016年一年间有1000篇以上的相关论文发布,论文内容涉及各种生理功能和病理症状等方面。EV大致可分为核内体来源的外泌体和细胞质膜来源的微囊泡,但即便是用提取纯度最高的超速离心法也难以将二者完全分离,所以简单地将10,000×g离心后上清中的EV称为小EV(主要是外泌体)。
西宝生物可提供日本和光纯药wako 外泌体提取试剂盒    咨询订购:400-021-8158
1. PS亲和法外泌体提取试剂盒
MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS提取高纯度完整状态的外泌体。
外泌体是各种细胞外泌的直径在30-100nm之间的膜囊泡。因外泌体内含mRNA、microRNA等核酸和蛋白质对相邻细胞具有交换信息的功能。作为细胞间信号传导的通讯工具和作为癌等各种疾病的生物标记话题比较热门。近些年关于外泌体研究很广泛,但是关于外泌体相关的实验技术,关于需要改进的课题存在很多。
例如,外泌体提纯方法中,超速离心法和聚合物沉淀法(市售试剂盒)混入多种杂质,给后续实验产生了许多障碍。抗体亲和法和密度梯度离心法,虽然可以提取到高纯度的外泌体,但不能提取完整外泌体,无法分析外泌体具有的生理功能,也是两种提取方法的问题所在。而免疫印迹法(WB)和Elisa检测法作为被广泛应用的外泌体检测的一般方法,又存在检测时需使用大量外泌体和难以检测到低表达水平的标记蛋白。
为了解决外泌体实验遇到的上述的各种问题, Wako 研发出MagCapture™外泌体提取试剂盒PS(MagCapture™  Exosome Isolation Kit PS)提取高纯度细胞外囊泡。
外泌体膜含有分泌细胞源的蛋白和脂质,众所周知磷脂酰丝氨酸(PS)在活细胞通过翻转酶作用导向细胞膜内侧,暴露在外泌体膜外侧3)。另外,T-cell immunoglobulin domain and mucin domain-containing protein 4(Tim4 通过巨噬细胞进行细胞凋亡的吞噬受体)蛋白通过细胞外域IgV域与含有钙离子的PS结合4)。
Wako无内毒素96孔板
基于上述知识,我们利用Tim4固化磁珠,在钙离子存在下捕捉培养上清和血清等样品中的外泌体,再添加螯合剂洗脱外泌体,这种外泌体纯化方法是和金泽大学医学系免疫学华山教授共同开发,并取得了成功。5)这是迄今为止取代黄金标准超速离心法的新型外泌体纯化方法。
MagCapture™ 外泌体提取试剂盒 PS
MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS采用磷脂酰丝氨酸(PS)亲和Tim4蛋白的PS亲和法,可方便获得高纯度的外泌体和其他来自细胞培养基和体液的EVs。提取的完整外泌体和其他EVs可用于不同实验:电镜分析,纳米粒子追踪分析,EVs的操作和分 析等。
什么是外泌体?
【特点】
● 可提取高纯度的完整外泌体
● 可从血清、血浆、尿液等样品中提取外泌体
● 重复性高,回收量稳定
● 操作简单,可处理多个样品(无需超速离心)
【产品列表】
货号 规格
299-77603 2Tests
293-77601 10Tests
参考文献:
[1]
Tkach, M. et al. Communication by Extracellular Vesicles : Where We Are and Where We Need to Go. Cell 164, 1226-1232 (2016).
[2]
Raimondo, F. et al. Advances in membranous vesicle and exosome proteomics improving biological understanding and biomarker discovery. Proteomics 11, 709-720 (2011).
[3]
Trajkovic, K. et al. Ceramide triggers budding of exosome vesicles into multivesicular endosomes. Science 319 (5867) : 1244–7 (2008).
[4]
Miyanishi, M. et al. Identification of Tim4 as a phosphatidylserine receptor. Nature 450, 435-439 (2007).
[5]
Nakai, W. et al. A novel affinity-based method for the isolation of highly purified extracellular vesicles. Sci. Rep. 6, 33935 (2016).
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